Detekcia bakteriálneho endotoxínu
Ponúkame služby testovania bakteriálnych endotoxínov. Naše testovacie metódy spĺňajú všetky požiadavky liekopisu (USP85, ChP1143), vrátane gélových-zrazenín endotoxínového testu TAL a LAL metód. Našim klientom poskytujeme aj experimenty na overenie rušenia a služby technickej podpory.
Aseptické vyšetrenie
Metódy priameho očkovania a membránovej filtrácie sú klasické testy sterility produktov, ktoré sú navrhnuté tak, aby zabezpečili neprítomnosť životaschopných kontaminujúcich mikroorganizmov. Tieto testy sa vykonávajú v prostredí izolátora alebo čistej miestnosti. Naše testovacie metódy spĺňajú všetky požiadavky liekopisu (USP71, ChP1101).
• Testované vzorky sa priamo naočkujú do dvoch kultivačných médií na detekciu aeróbnych a anaeróbnych mikroorganizmov.
• Po inokulácii sa obe kultivačné médiá inkubujú 14 dní. Na zistenie dôkazu mikrobiálneho rastu sa vykonáva prerušované pozorovanie a záverečné pozorovanie na konci testovacieho obdobia.
• sterilné uzavreté filtračné zariadenie umožňuje súčasné prefiltrovanie rovnakých objemov testovaných vzoriek cez dva membránové filtre.
• Vzorky sa inkubujú v dvoch kultivačných médiách počas 14 dní, aby sa uľahčila detekcia aeróbnych a anaeróbnych mikroorganizmov.
Testovanie mykoplazmy
Kontaminácia mykoplazmami je bežným problémom v bunkovej kultúre. Čo ďalej komplikuje, kontaminanty môžu rásť do vysokých titrov bez toho, aby vykazovali zákal alebo cytopatické účinky, čo sťažuje detekciu. Bunkové substráty používané pri biofarmaceutickej výrobe musia byť preukázané, že neobsahujú náhodné látky vrátane mykoplazmy. Testovanie na mykoplazmy sa musí vykonávať vo všetkých štádiách vývoja produktu, vrátane surovín, bunkových bánk, zásob vírusových semien, nespracovaných hromadných zberaných materiálov a konečných produktov.
Metóda priamej kultivácie
Testovacie vzorky sa priamo naočkujú na agarové platne/polo{0}}tekuté médiá a tekuté médiá.
Preukázalo sa, že vybrané agarové/polo{0}}tekuté a tekuté médiá majú dobré rastové-vlastnosti podporujúce rast viacerých druhov mykoplazmy.
Každý test na detekciu mykoplazmy zahŕňa negatívne a pozitívne kontroly na overenie vhodnosti testovacieho systému.
Počas inkubačnej doby sa kvapalné kultúry subkultivujú vo viacerých časových bodoch, aby sa pozoroval rast mykoplazmy.
Na konci inkubačnej doby sa kontaminácia mykoplazmami hodnotí pozorovaním prítomnosti kolónií mykoplazmy na agarových platniach alebo zmenou farby tekutého média.
Celková inkubačná doba je 28 dní.
Indikátorová metóda kultivácie buniek
Niektoré kmene mykoplazmy sa považujú za „nekultivovateľné“, pretože nerastú v štandardných kultivačných médiách. Kultúry buniek Vero sa môžu použiť na obohatenie týchto kmeňov mykoplazmy. Po jednom-týždňovom kultivačnom období sa bunky fixujú, zafarbia sa fluorescenčnými farbivami viažucimi DNA-a vyhodnotia sa pod mikroskopom.
V prípadoch mykoplazmovej infekcie sa na povrchu bunky a v jej okolí objaví charakteristický vzor jasnej fluorescencie, keď je kontaminácia závažná.
Proteínové, peptidové, vektorové a plazmidové produkty sú obzvlášť citlivé na environmentálne faktory. Štúdie testovania stability sa používajú na vyhodnotenie účinnosti biofarmaceutických produktov v rôznych podmienkach prostredia v konkrétnom časovom rámci. Výsledky určujú odporúčané podmienky skladovania a prepravy liekov a produktov a identifikujú primeranú-životnosť alebo doby opakovania testov.
Testy stability v reálnom{0}}čase a zrýchlené
Čas použiteľnosti sa zvyčajne odhaduje na základe výsledkov{0}}testovania stability v reálnom čase a zrýchleného testovania stability. Pri testovaní stability-v reálnom čase je produkt skladovaný za odporúčaných skladovacích podmienok a nepretržite monitorovaný, kým nespĺňa špecifikácie produktu. Pri zrýchlenom testovaní stability sa produkt skladuje v podmienkach zvýšeného stresu (napr. zvýšená teplota a/alebo vlhkosť). Degradáciu za odporúčaných podmienok skladovania možno potom predpovedať pomocou známeho vzťahu medzi faktorom zrýchlenia a rýchlosťou degradačných profilov.
Štúdie nútenej degradácie
Štúdie nútenej degradácie sa uskutočňujú prostredníctvom štúdií stability pri extrémnych podmienkach skladovania, aby sa urýchlila rýchlosť degradácie. Kvôli nelineárnej povahe kinetiky degradácie proteínov majú tieto štúdie obmedzenú predikčnú hodnotu pre životnosť biofarmaceutických produktov. Štúdie nútenej degradácie sú však obzvlášť užitočné v ranom- štádiu vývoja liekov, pretože poskytujú informácie o spôsoboch rozkladu a degradácie produktu, umožňujú optimalizáciu formulácie a pomáhajú pri určovaní podmienok skladovania na kontrolu stability produktu.
Dlhodobé{0}}štúdie stability
V prípade biofarmaceutických produktov sa dlhodobé-štúdie stability vykonávajú za predpokladaných podmienok skladovania, zatiaľ čo krátkodobé-štúdie sa vykonávajú pri vyšších teplotách, aby sa podporili-hodnotenia stability pri používaní a pri prepravných podmienkach.