Ciele detekcie a základné koncepty
účel
V bunkovej a génovej terapii (CGT) slúži testovanie replikačného-kompetentného vírusu (RCV) ako kritická kontrola kvality a bezpečnostné opatrenie. Tento test deteguje replikačne-kompetentné vírusy, ktoré môžu vzniknúť počas výroby prostredníctvom rekombinácie alebo mutácie, čím predchádza rizikám, ako sú imunitné reakcie alebo tumorigenéza u pacientov.
Definícia
Vírusové vektory bežne používané v CGT-vrátane AAV, lentivírusov, retrovírusov a adenovírusov-sú zvyčajne replikačne-defektné. Počas výroby však môžu získať replikačnú kompetenciu prostredníctvom homológnej alebo nehomologickej rekombinácie alebo reverzných mutácií. Výsledkom sú kompetentné varianty replikácie{6}}, ako sú rcAAV, RCL, RCR a RCA, ktoré sa môžu replikovať autonómne a zostať infekčné za permisívnych podmienok.
Hlavné ciele testovania
Typické rizikové scenáre RCV podľa typu vektora:
|
Typ vektora |
Typ RCV |
Typické rizikové scenáre |
|
Adeno{0}}asociovaný vírus (AAV) |
Replikácia-kompetentný AAV (rcAAV) |
V prítomnosti pomocného vírusu sa rcAAV môže replikovať, potenciálne spúšťať imunitné reakcie a zvyšovať tumorigénne riziko. |
|
Lentivírusový vektor (LV) |
Replikácia-kompetentný lentivírus (RCL) |
Vektory odvodené od HIV-1 môžu podstúpiť reverzné mutácie, čím sa obnoví patogénny potenciál. |
|
Retrovírusový vektor (RV) |
Replikačný-retrovírus (RCR) |
Reverzné mutácie môžu viesť k abnormálnej bunkovej proliferácii a inzerčnej mutagenéze. |
|
Adenovírus (AdV) |
Replikačný-adenovírus (RCA) |
Vektory s deléciou AE1- sa môžu rekombinovať so sekvenciami E1 v produkčných bunkách (napr. HEK293), pričom sa regenerujú vírusy schopné replikácie divokého -typu. |
Výhody našej platformy na detekciu RCV
Spoločnosť HyQure Biotech zaviedla komplexné detekčné schopnosti pre replikáciu-kompetentné vírusy (RCV), vrátane rcAAV, RCL, RCR a RCA. Náš test rcAAV má certifikáciu CNAS-. Náš viac-dimenzionálny systém detekcie RCV poskytuje tri hlavné výhody-presnosť, rýchlosť a súlad s predpismi. Metóda bunkovej kultúry slúži ako zlatý štandard; v kombinácii s detekciou koncových bodov špecificky identifikuje infekčné RCV, čím priamo rieši riziká klinickej bezpečnosti, pričom spĺňa všetky požiadavky na testovanie podľa predpisov.